Anteras de duas cultivares de soja foram cultivadas em meio de cultura basal B5 longo gelificado com agarose ou Phytagel®. Análises citológicas das anteras foram conduzidas durante os primeiros 45 dias de cultura para avaliar a viabilidade e o estágio de desenvolvimento dos micrósporos. A freqüência de formação de calos foi analisada após 45 dias do início da cultura. A análise da variância da viabilidade do micrósporo mostrou interações significativas de Cultivar X Agente Gelificante X Dias de Cultura. As freqüências de grãos de pólen viáveis diminuíram significativamente com o tempo de cultura, dentro de cada cultivar e agente gelificante testado. A interação Dia X Cultivar foi significante para as freqüências de grãos de pólen binucleados simétricos e estruturas multinucleados/multicelulares. O efeito do agente gelificante na freqüência de grãos de pólen binucleados simétricos e estruturas multinucleados/multicelulares não foi significante. Com relação às freqüências de calos e estruturas embriogênicas formadas, houve diferença significativa entre cultivares (IAS5= 14.8% e BRS 133=6.6%). O agente gelificante não mostrou efeito em tais freqüências.

Anthers of two soybean cultivars were cultured in B5 long basal culture media gelled with agarose or PhytagelTM. Cytological examinations of the anthers were carried out during the first 45 days of culture to assay the viability and developmental stage of microspores. Frequency of callus formation was recorded at 45 days of culture. The analysis of variance of the microspore viability assay showed significant Cultivar X Gelling Agent X Day of Culture interactions. The frequencies of viable microspores decreased significantly with time of culture, within each cultivar and gelling agent tested. The interaction Day X Cultivar was significant for the frequencies of binucleate symmetrical grains and multinucleate/multicellular structures. The effect of gelling agents on the frequency of binucleate symmetrical pollens grains and multinucleate/multicellular structures was not significant. About the frequencies of calli and embryogenic calli formed, a significant difference was detected between the cultivars (IAS5= 14.8% and BRS 133=6.6%). Gelling agents showed no effect over these frequencies.

Anteras obtidas de botões florais da cultivar IAS-5 de soja foram cultivadas em dois meios de cultura basais (B5 e B5 longo). Análises citológicas das anteras cultivadas in vitro foram realizadas durante os primeiros 20 dias de cultura, a fim de avaliar a viabilidade (por testes de carmim propiônico e FDA) e o estágio de desenvolvimento dos grãos de pólen. As freqüências de grãos de pólen viáveis variaram significativamente entre os tamanhos de botões florais na análise com carmim propiônico. O meio de cultura basal e o tamanho do botão floral não têm um claro efeito nas freqüências de pólens binucleados simétricos e multinucleados. Contagens cromossômicas de micrósporos metafásicos ao longo do período de cultura mostraram nível de ploidia superior ao normal (n=20).

Anthers obtained from flowers buds of soybean cultivar IAS-5 were cultured in two basal culture media (B5 and B5 long). Cytological examinations of the in vitro anthers were performed during the first 20 days of culture to assay the viability (by propionic-carmine and fluorescein diacetate tests) and the stage of development of pollen grains. The frequencies of viable pollen grains varied significantly between bud sizes on the propionic-carmine analysis. The basal culture media and bud size had no clear effect on the frequencies of binucleate symmetrical and multinucleate pollen grains. Chromosome counts of metaphasic microspores throughout the culture period showed microspores with higher ploidy level in addition to normal chromosome number (n=20).

Com o objetivo de estabelecer um sistema alternativo de regeneração de plantas para cultivares de soja [Glycine max (L.) Merrill] utilizadas em programas de melhoramento no Brasil, dez genótipos foram testados quanto ao seu potencial embriogênico. Os cotilédones utilizados como explantes foram excisados de sementes imaturas de plantas provindas do campo. Após 45 dias em meio de indução, o número de cotilédones embriogênicos e o número de embriões somáticos por cotilédone imaturo foram avaliados. A porcentagem de explantes que produziram embriões somáticos variou de 1 a 70% entre cultivares. O número médio de embriões somáticos produzidos por par de cotilédones variou de 0,01 a 10,3, com uma média de 3,4. Culturas em suspensão foram iniciadas a partir de três cultivares suscetíveis a Agrobacterium tumefaciens. Suspensões foram estabelecidas com sucesso para os cultivares Bragg e IAS5. Em um mês, o volume celular aumentou 8,1 vezes para Bragg e 3,5 vezes para IAS5 e o peso fresco aumentou 6,6 e 2,8 vezes, respectivamente. Todo o tecido de cada cultivar foi transferido para meio de maturação e, subseqüentemente, para meio de regeneração. A freqüência de germinação foi de 45,7 e 54,9% para Bragg e IAS5, respectivamente. Durante uma semana, as plantas foram expostas gradualmente à umidade do ambiente, sendo então plantadas em solo em casa de vegetação. Todas as plantas produziram sementes.

In an attempt to establish an alternative plant regeneration system for soybean [Glycine max (L.) Merrill] cultivars used in Brazilian breeding programs, ten genotypes were tested for their embryogenic potential. Cotyledons were removed as explants from immature seeds harvested from field-grown plants. After 45 days on induction medium, the number of responding cotyledons and the number of somatic embryos per immature cotyledon were evaluated. The percentage of explants that produced somatic embryos varied from 1 to 70% among cultivars. The average number of somatic embryos produced per cotyledon pair ranged from 0.01 to 10.3 with a mean of 3.4. Suspension cultures were initiated with three Agrobacterium tumefaciens susceptible cultivars. Suspensions were successfully developed from Bragg and IAS5 cultivars. The packed cell volume, in one-month growth, increased 8.1 fold for Bragg and 3.5 fold for IAS5 and the fresh weight increased 6.6 and 2.8 fold, respectively. The cultivars differed for the analysed parameters. All tissue from each cultivar was transferred to the maturation medium and subsequently to the germination medium. The germination frequency was 45.7 and 54.9% for Bragg and IAS5, respectively. Plants were gradually exposed to ambient humidity over one week and then planted in soil. All plants yielded seeds in the greenhouse.